對于許多高通量篩選(HTS)部門來說，運(yùn)行通量最大化和分析可靠性愈漸取決于一個(gè)關(guān)鍵因素：分析即用型板。這類分析即用型板通常已經(jīng)包含了預(yù)先從儲存庫中以特定濃度制備好的待測。DMSO是常見的溶解化合物的試劑，但DMSO的濃度一旦高于1%，就會(huì)顯著影響分析結(jié)果。因此，在制備分析即用型板時(shí)，要求準(zhǔn)確地移取納升級含DMSO的樣品儲存液，讓DMSO保持低濃度。微升級以下的液體操作在技術(shù)上具有一定的挑戰(zhàn)性，傳統(tǒng)方法難以精確地確認(rèn)低至幾十個(gè)納升的量取。
mosquito?是一種小體積液體處理儀器，它將低成本的一次性加樣針頭系統(tǒng)和容積式替換移液方式相結(jié)合，來確保零交叉污染。它在X、Y和Z軸的定位精確性優(yōu)于0.05mm。mosquito能夠移取上至1.2 μL、下至 50 nL的體積，而不需要清洗針頭。
這些特征，讓mosquito在將納升級的化合物溶液從存儲庫中轉(zhuǎn)移到分析板上這種復(fù)雜轉(zhuǎn)移操作時(shí)，擁有無比的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。從而讓這一在蛋白結(jié)晶領(lǐng)域已享有盛譽(yù)的納升級液體處理工作站，越來越多地在各大跨國藥廠和CRO的研發(fā)部得到應(yīng)用，在配制分析即用型板時(shí)進(jìn)行納升級液體分配。
為了評估m(xù)osquito液體處理器的準(zhǔn)確性和精確度，本文使用Artel MVS來驗(yàn)證了濕式和干式分液中mosquito移取一系列不同目標(biāo)體積的水溶液和DMSO溶液時(shí)的精確度和準(zhǔn)確性。
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操作
為了研究mosquito分液的精確性和準(zhǔn)確性，本實(shí)驗(yàn)利用mosquito分別將MVS水溶液樣品和含DMSO的MVS樣品溶液分配至384孔板中；其中含DMSO的樣品溶液是通過混合MVS儲存（染料）液和DMSO溶劑來制備的。隨后利用獨(dú)立的分液器將MVS稀釋液或緩沖液分配到孔中。通過MVS測量吸光值來計(jì)算每個(gè)孔的體積值。
Artel MVS?
Artel MVS能在幾分鐘之內(nèi)可靠地驗(yàn)證自動(dòng)化液體處理器的準(zhǔn)確性和精確度。MVS所采用的雙染料比例式光度測定利用了兩種有著不同吸收峰的染料，它們分別為520 nm（紅色）和730 nm（藍(lán)色）。六種包含不同濃度紅色染料的樣品溶液，用于檢測儀器在將10 nL-350 μL的全部體積范圍的液體分配到96孔和384孔板時(shí)的性能。藍(lán)色染料的濃度在全部體積范圍內(nèi)所有樣品溶液中都是恒定的，如同稀釋緩沖液的濃度一樣。因此藍(lán)色染料作為內(nèi)標(biāo)，來計(jì)算每孔的溶液深度。
自動(dòng)化液體處理器分配樣品溶液，并稀釋到微滴定板的孔中，然后分別在雙波長下測量每孔的吸光度。MVS應(yīng)用比爾-朗伯定律，利用吸光值來自動(dòng)計(jì)算液體處理工作站的每個(gè)移液通道所分配體積的精確度和準(zhǔn)確性。
水溶液的準(zhǔn)確性和精確度結(jié)果
在為優(yōu)化加樣性能所采取的調(diào)整很少的情況下，利用MVS對mosquito分配含DMSO溶液樣品和水溶液樣品的準(zhǔn)確性和精確度性能進(jìn)行了測定。精確度結(jié)果與mosquito公布的性能參數(shù)進(jìn)行比較。
圖3顯示了mosquito在分別將水溶液和DMSO溶液分配至干燥的384孔板時(shí)所測量得到的精確度性能。對于DMSO，每次體積轉(zhuǎn)移都使用了單獨(dú)的加樣針。對于水溶液，對于特定加樣體積的重復(fù)分液，加樣針是重復(fù)使用的；僅在加樣體積改變時(shí)才更換加樣針。收集的數(shù)據(jù)顯示了精確度性能在DMSO和水狀樣品溶液中都具有極佳的可比性。mosquito在所測定的各種特定體積下移液，在大多數(shù)情況下，精確度性能比廠家公布的參數(shù)還要好得多。
圖4顯示了MVS所測量得到的mosquito的準(zhǔn)確性。在進(jìn)行水溶液和DMSO樣品溶液的分液時(shí)，mosquito分液的誤差都低于5%。在液體處理器中設(shè)定補(bǔ)償能實(shí)現(xiàn)兩種樣品類型加樣準(zhǔn)確性結(jié)果的一致（未顯示）。
水溶液移液的加樣針間差異
在此次性能評估中，水溶液的分配是通過一組16個(gè)單獨(dú)的加樣針、6次重復(fù)的分液（不更換加樣針）來進(jìn)行的。每次分配時(shí)加樣針之間的差異是通過計(jì)算MVS所測得的每個(gè)加樣針體積的標(biāo)準(zhǔn)偏差來測定的。圖5顯示，盡管mosquito加樣針是一次性的，但加樣針的性能在多次使用后幾乎沒有改變。此次展示的數(shù)據(jù)僅限于同一個(gè)加樣針的6次重復(fù)。
線性
收集的數(shù)據(jù)顯示在分配DMSO溶液和水溶液樣品溶液時(shí)，實(shí)際的分配體積與預(yù)期體積之間的相關(guān)性水平高，從而證明了mosquito在分配溶劑時(shí)的一致性能（圖6）。
結(jié)論
測量結(jié)果表明：無論是水溶液和含DMSO的樣品，mosquito在各種不同體積液體的分配中均表現(xiàn)出了比自身標(biāo)注特性更出色的性能。
MVS能很快且方便地檢測mosquito的準(zhǔn)確性和精確度，只需大約一天的時(shí)間即可收集全所有提交的數(shù)據(jù)。
盡管制造廠商并沒有特別強(qiáng)調(diào)mosquito的準(zhǔn)確性（accuracy），但經(jīng)MVS性能檢測結(jié)果表明在分配檢測體積范圍內(nèi)的水性和含DMSO樣品時(shí)，無需調(diào)整和校正，誤差也小于5%。
mosquito能可靠地分配不同的液體類型，且有著相同的精確性能。
mosquito的加樣針能使用多次，也不會(huì)帶來加樣結(jié)果的差異。
mosquito?儀器特性
零交叉污染
移液體積范圍從50nL到1200nL
幾乎可忽略不計(jì)的死體積，減少樣品損耗
滿足96、384和1536孔板格式
移液體積為50nL時(shí)差異系數(shù)（CVs）<8%， 100nL時(shí)CVs < 4%
準(zhǔn)確性：整體在±5%之內(nèi)
可與其他自動(dòng)化機(jī)器人輕松整合
滬公網(wǎng)安備31011502016460號
